小鼠睾丸间质细胞的分离纯化与体外培养的研究

作者：刘玉志; 李青旺; 江中良; 王翠玲; 张欢欢; 洪洁赟

来源：黑龙江畜牧兽医, 2010, (13): 5-7.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2010.13.080

• 小鼠
• 睾丸间质细胞
• 分离
• 体外培养 Mouse
• Leydig cells
• isolation
• culture in vitro

为了寻求一种快速、高效的体外分离、纯化小鼠睾丸间质细胞的方法,试验采用两种酶(胶原酶Ⅳ和0.25%胰蛋白酶)消化法和6个梯度(70%、65%、60%、55%、50%、45%)的Percoll液对小鼠睾丸间质细胞进行分离、纯化,对分离的细胞进行细胞学观察、台盼蓝染色、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)染色,采用物理方法、胶原酶Ⅳ+0.25%胰蛋白酶和柠檬酸钠+KCl对睾丸间质细胞进行消化传代培养。结果表明:胶原酶Ⅳ和0.25%胰蛋白酶限时消化能够获得较高活率(>90%)的小鼠睾丸间质细胞;经Percoll细胞分离液分离的细胞纯度高达86%,且在34℃、5%CO2条件下培养的细胞生长良好。

• 单位
  西北农林科技大学