hTFPI-2基因重组腺病毒载体的构建和体外U937单核细胞的表达

作者：潘俊杰; 施海明; 罗心平; 马端; 梁旺; 张进; 朱军; 李剑

来源：生物医学工程学杂志, 2011, (02): 326-331.

• 腺病毒载体
• 人组织因子途径抑制物-2
• 绿色荧光蛋白
• 噬斑
• U937单核细胞 Adenovirus vector
• Tissue factor pathway inhibitor2(TFPI-2)
• Green fluorescent protein(GFP)
• Plaque
• U937 monocytes

采用AdMax系统以复制缺陷型腺病毒为载体构建含有人组织因子途径抑制物-2(hTFPI-2)基因的腺病毒载体。用含EcoRI、SacI酶切位点的引物从pIRES2-EGFP-TFPI-2质粒中PCR扩增目的基因hTFPI-2,然后以限制性内切酶EcoRI和SacI消化hTFPI-2基因片段及腺病毒穿梭质粒PDC316-IRES-EGFP,用T4连接酶连接形成重组穿梭质粒PDC316-IRES-EGFP-hTFPI-2,与腺病毒骨架质粒pBHGloxΔE1,3Cre用脂质体Lipofectamine2000共转染HEK293细胞,包装成重组体腺病毒Ad-hTFPI-2。测序结果证明hTFPI-2...

• 单位
  复旦大学附属华山医院; 复旦大学