血红素加氧酶1敲减对肺腺癌细胞生物学特性的影响及其机制

作者：曹琳; 所信君; 江伟; 赵丹; 闫晓洁; 杨洁^*; 马振毅^*

来源：中华肿瘤杂志, 2019, 41(11): 813-819.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0253-3766.2019.11.003

• 肺腺癌
• 血红素加氧酶1
• 自噬
• 增殖
• 侵袭
• 迁移

目的观察血红素加氧酶1(HO-1)基因敲减对肺腺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移的影响, 并探讨其机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人支气管上皮细胞(HBECs)和人肺癌细胞系A549、H1299、H358和H1993中HO-1 mRNA的表达水平, 免疫组织化学染色检测人肺腺癌标本组织中HO-1的表达量。采用RNA干扰技术, 将HO-1短发卡RNA(shRNA)转染A549细胞, 制备稳定低表达HO-1的A549细胞(HO-1 shRNA组), 并行RT-qPCR和Western blot验证。应用自噬诱导剂Torin1或抑制剂Bafilomycin A1(Baf A1)处理HO-1 shRNA组A549细胞和对照组细胞, Western blot检测各组自噬标志物LC3B和p62的表达。采用计数法、Transwell实验和伤口愈合实验分别评估各组A549细胞的增殖、侵袭和迁移能力。结果肺癌细胞系A549、H1299、H358和H1993中HO-1 mRNA的表达均显著高于HBECs, 人肺腺癌组织中HO-1过表达。未处理、Torin1处理和Baf A1处理情况下, HO-1 shRNA组细胞的LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值和p62蛋白表达量均高于相应对照组(均P<0.05);经过11 d培养后, HO-1 shRNA组细胞数分别为相应对照组的41.8%、30.4%和14.0%;HO-1 shRNA组下室细胞数分别为(35.7±2.1)、(27.0±1.0)和(38.0±1.0)个/视野, 均低于相应对照组[分别为(66.0±9.2)、(39.3±1.2)和(43.0±2.6)个/视野, 均P<0.05];HO-1 shRNA组的迁移距离分别为(7.47±0.91)、(4.23±0.82)和(5.42±0.24)mm, 均低于相应对照组[分别为(10.07±1.26)、(7.14±0.07)和(12.04±0.80)mm, 均P<0.05]。结论 HO-1敲减通过阻止自噬来抑制肺腺癌细胞增殖、侵袭和迁移。

• 单位
  天津医科大学第二医院; 天津医科大学; 南开大学; 药物化学生物学国家重点实验室; 天津医科大学总医院