HSP90抑制剂对缺氧诱导的RPE细胞SDF-1表达的影响

作者：王业青; 张晓梅; 穆华; 王巍

来源：眼科新进展, 2009, 29(10): 748-751.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2009.10.010

• 基质细胞衍生因子-1
• 视网膜色素上皮
• 缺氧
• 热休克蛋白90

目的研究热休克蛋白(heat shock protein90,HSP90)抑制剂17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin,17-AAG)对缺氧诱导的视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞基质细胞衍生因子-1(stro-malcell-derivedfactor-1,SDF-1)表达的影响。方法将培养的第3代RPE细胞分为缺氧对照组、DMSO对照组和17-AAG预处理组。其中17-AAG预处理组根据浓度不同又分为6组:0.01μmol.L-1、0.10μmol.L-1、0.50μmol.L-1、1.0μmol.L-1、5.0μmol.L-1、10.0μmol.L-1。利用氯化钴建立体外RPE细胞的化学缺氧模型,不同浓度的HSP90抑制剂17-AAG预处理RPE细胞1h后给予12h缺氧处理,RT-PCR和Westernblotting方法检测SDF-1表达变化情况。结果缺氧对照组、DMSO对照组和不同浓度17-AAG预处理组SDF-1mRNA与内参β-actinmRNA光密度比值分别为0.89±0.04、0.93±0.07、0.62±0.06、0.52±0.06、0.43±0.06、0.28±0.04、0.21±0.04、0.17±0.03;SDF-1蛋白与内参β-actin蛋白光密度比值分别为0.76±0.04、0.80±0.06、0.65±0.04、0.34±0.03、0.20±0.02、0.16±0.02、0.07±0.02、0.05±0.01。与缺氧对照组比较,DMSO对照组SDF-1mRNA和蛋白的表达无明显变化,而不同浓度17-AAG预处理组SDF-1mRNA和蛋白的表达明显降低(P均<0.05),呈浓度依赖性。结论HSP90的特异抑制剂17-AAG能有效抑制缺氧条件下RPE细胞SDF-1表达。

• 单位
  哈尔滨医科大学附属第一医院