梁山慈竹SSR-PCR体系的优化

作者：王丽丽; 孙昌法; 胡尚连^*

来源：江苏农业科学, 2020, 48(05): 61-64.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2020.05.012

• 梁山慈竹
• 简单重复序列(SSR)
• 聚合酶链式反应(PCR)
• 正交试验
• 优化

以梁山慈竹为材料,提取叶片DNA并将其作为模板,采用正交设计试验优化影响梁山慈竹简单重复序列-聚合酶链式反应(SSR-PCR)体系的3个主要因素,并对21个梁山慈竹不同品系进行稳定性验证,结果表明,优化的20μL SSR-PCR反应体系为2×Taq PCRMix 8μL、模板DNA(20 ng/μL) 2.5μL、SSR引物(1.0×10-4 mmol/L) 1μL,无菌蒸馏水补足至20μL;使用SSR引物BMK.38757对21个梁山慈竹不同品系进行扩增,扩增产物大小在140 bp左右,共有4个多态性位点;使用SSR引物L6、R83对梁山慈竹进行扩增,均获得3个多态性位点,且条带清晰。

• 单位
  西南科技大学