FRNK质粒转染抑制肝星状细胞增殖机制研究

作者：霍晓霞; 张晓岚; 申建刚; 魏娟; 窦永青

来源：中国应用生理学杂志, 2009, (01): 69-73.

DOI：10.13459/j.cnki.cjap.2009.01.030

• 肝星状细胞
• 增殖
• 黏着斑激酶相关非激酶
• 黏着斑激酶
• 细胞周期

目的:探讨黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）质粒瞬时转染肝星状细胞（HSC）,对纤维连接蛋白（FN）刺激的HSC增殖的影响及其机制。方法:应用体外细胞培养技术,脂质体介导法进行FRNK质粒转染;Western blot技术检测FRNK、黏着斑激酶（FAK）、p-FAK(Tyr397)蛋白的表达情况,鉴定转染效果;改良MTT法测定HSC增殖;流式细胞术（FCM）检测细胞周期时相。结果:FRNK质粒转染HSC 48 h时,FRNK蛋白表达最强（P<0.01）;FAK蛋白转染前后无明显差异（P>0.01）;FRNK质粒组p-FAK(Tyr397)蛋白含量（0.40±0.14）较空质粒组（1.89±0.25）显著下降（P<0.01）;FRNK在HSC大量表达后,于转染12 h、24 h、48 h的HSC增殖抑制率分别为20.07%、26.16%和29.77%（P<0.01）,呈时间依赖性关系;FRNK质粒组G0/G1期细胞数（71.4±2.81）较空质粒组（48.9±1.66）明显增加（P<0.01）。结论:脂质体介导下FRNK质粒转染,可使外源性FRNK在HSC内大量表达,抑制FAK磷酸化,阻滞HSC周期时相于G0/G1期,抑制HSC增殖。

• 单位
  石家庄市第三医院; 河北医科大学第二医院