左归丸对GDM模型母鼠子鼠胰岛功能的影响

作者：谭贝西; 赵乐; 冯忆; 王恬恬; 王超群; 王永辉^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 29(17): 1-8.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20230604

• 妊娠期糖尿病
• 胰腺发育
• 胰岛功能
• 左归丸

目的：探讨左归丸对妊娠期糖尿病（GDM）模型母鼠子鼠胰岛功能的影响，并基于胰腺产后增殖过程探讨左归丸改善子鼠胰岛功能的作用机制。方法：选取血糖正常的健康雌性SD大鼠与雄性大鼠按照2∶1比例同笼，以阴道栓或阴道涂片为依据，选取受孕雌性大鼠将其分为正常组、模型组、胰岛素组（地特胰岛素，20 U·kg-1）和左归丸低、高剂量组（1.89、3.78 g·kg-1）。除正常组外，用链脲佐菌素复制GDM大鼠模型，通过对母鼠血糖检测判断模型是否建立，除正常组和模型组外，其余组均每日给药。于子鼠出生后21 d时，每组检测6只子鼠空腹血糖值（FBG）与血清中空腹胰岛素（FINS），计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR），每组另取12只子鼠进行口服糖耐量（OGTT）检测；出生22 d(B22d)腹主动脉取血，利用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组子鼠血清中胰岛素（INS）、胰高血糖素（GC）、胰多肽（PPY）、生长抑素（SS）观察胰岛各细胞所表达激素的水平，利用苏木素-伊红（HE）染色观察各组子鼠胰腺组织病理变化；利用免疫荧光法（IF）观察子鼠胰岛面积与结构；且通过蛋白免疫印迹法（Western blot）检测子鼠胰腺β细胞发育成熟、功能表达密切相关的关键蛋白胰腺十二指肠同源框蛋白1(Pdx1)、Nkx6.1、葡萄糖运载体2(Glut2)表达。结果：与正常组比较，模型组子鼠FBG水平、FINS水平及HOMA-IR均显著升高（P<0.01）；与模型组比较，胰岛素组FBG水平及HOMA-IR显著降低（P<0.01），左归丸低剂量组FBG水平明显降低（P<0.05），左归丸高剂量组FBG水平、FINS水平及HOMA-IR均显著降低（P<0.01）。与正常组比较，模型组大鼠OGTT 60 min血糖值、曲线下面积（AUC）指数明显升高（P<0.05,P<0.01）；与模型组比较，左归丸高剂量组子鼠OGTT血糖值在60 min、AUC指数明显降低（P<0.05,P<0.01）。胰腺组织HE染色观察，与正常组比较，模型组胰岛数量减少，腺泡细胞排列疏松；与模型组比较，给药各组胰岛数量增加，腺泡细胞排列紧密。与正常组比较，模型组子鼠血清中INS、GC、PPY、SS含量均显著升高（P<0.01）；与模型组比较，左归丸低、高剂量组及胰岛素组子鼠血清中INS、GC、PPY、SS含量均明显降低（P<0.05,P<0.01）。免疫荧光结果显示，与正常组比较，模型组INS阳性率明显降低（P<0.05）；与模型组比较，左归丸低高剂量组明显增高（P<0.05）;GC阳性率各组间差异无统计学意义；单个胰岛中INS与GC所占比例中，与正常组比较，模型组INS所占比例显著降低（P<0.01）,GC所占比例显著增高（P<0.01）；与模型组比较，左归丸低、高剂量组INS所占比例显著增高（P<0.01）,GC所占比例显著降低（P<0.01）。与正常组比较，模型组GDM子鼠胰腺组织中Pdx1、Nkx6.1、Glut2蛋白表达含量均明显降低（P<0.05）；与模型组比较，胰岛素组、左归丸低剂量组GDM子鼠胰腺组织中Pdx1、Nkx6.1蛋白表达含量均明显增高（P<0.05），左归丸低、高剂量组Glut2蛋白表达含量均明显增高（P<0.05）。结论：左归丸可促进GDM模型大鼠子鼠胰岛发育，改善胰岛形态及功能，缓解胰岛素抵抗表现，其作用机制可能与调节子代胰腺组织中Pdx1、Nkx6.1、Glut2蛋白表达有关。

• 单位
  山西中医药大学