大鼠CXCR4基因RNAi慢病毒载体的构建及其在骨髓间质干细胞中的表达

作者：陈东平; 张志坚; 吴秀丽; 张彦定

来源：生物工程学报, 2009, (02): 299-305.

• 慢病毒
• CXCR4
• RNA干扰
• 骨髓间质干细胞
• 大鼠 lentiviral vector
• CXCR4
• RNA interference
• mesenchymal stem cells
• rat

为深入研究CXCR4在骨髓间质干细胞(MSCs)体内迁移中的作用,构建CXCR4基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体并实现其在大鼠MSCs(rMSCs)中表达。根据大鼠CXCR4 mRNA序列,设计并合成包含各靶序列的互补DNA链,插入pSUPER载体的H1 RNA启动子后面,产生pRiCXCR4,将其中的CXCR4 shRNA表达结构酶切插入慢病毒载体质粒pNL-EGFP,产生pNL-RiCXCR4-EGFP。在脂质体介导下与包装质粒pHELPER和包膜质粒pVSVG共转染293T细胞,包装生产慢病毒,测定慢病毒功能滴度。慢病毒转导rMSCs后,用Real-time RT-PCR、Weste...

• 单位
  福建师范大学; 福建医科大学; 福建医科大学附属第一医院