紧密连接蛋白Occludin表达与小鼠肠屏障功能障碍和炎性出血的关系

作者：王莉芬; 何伟; 王懿凡

来源：临床和实验医学杂志, 2021, 20(18): 1908-1912.

DOI：10.3969/j.issn.1671-4695.2021.18.002

• 小鼠
• 紧密连接蛋白Occludin
• 肠屏障
• 免疫组织化学
• 炎性出血

目的探讨紧密连接蛋白Occludin表达与小鼠肠屏障功能障碍和炎性出血的关系。方法以15只C57BL/6新生小鼠为研究对象,通过交替饮用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液和去离子水建立炎症性肠病模型,并根据实验设置分为对照组(正常小鼠+腹腔注射生理盐水)、模型组(模型小鼠+腹腔注射生理盐水)和Occludin转染组(模型小鼠+腹腔注射50μL Occludin过表达慢病毒载体)。注射1周后通过蛋白印迹分析各实验组小鼠体内紧密连接蛋白Occludin的表达。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒分析提取组织中促炎细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β的水平。通过异硫氰酸荧光素-葡聚糖(FITC-D)方法和血液中脂多糖(LPS)的浓度评估小鼠的肠屏障功能。通过免疫组织化学对小鼠肠组织进行评分。通过比较小鼠结肠长度与体重比评估结肠发育。通过逆转录聚合酶链式扩增(RT-PCR)实时分析凋蛋白p53、Bax和Bcl-2的mRNA表达。结果模型组较对照组中Occludin的蛋白表达降低(P <0.05),Occludin转染组较模型组Occludin的蛋白表达升高(P <0.05)。模型组较对照组中TNF-α、IL-6和IL-1β的水平升高(P <0.05),Occludin转染组较模型组TNF-α、IL-6和IL-1β的水平降低(P <0.05)。模型组较对照组中FITC-D和LPS升高(P <0.05),Occludin转染组较模型组FITC-D和LPS降低(P <0.05)。模型组较对照组中组织学评分和粪便出血评分升高(P <0.05),Occludin转染组较模型组相应评分降低(P <0.05)。模型组较对照组结肠长度与体重之比值降低(P <0.05),Occludin转染组较模型组比值升高(P <0.05)。模型组较对照组p53、Bax的mRNA表达升高,Bcl-2表达降低(P <0.05),Occludin转染组较模型组Bax的mRNA表达降低,Bcl-2表达升高(P <0.05)。结论紧密连接蛋白Occludin的过表达减轻了DSS引起的小鼠肠黏膜损伤,促进体内肠道形态和肠屏障完整性的更新。

• 单位
  琼海市人民医院