摘要
目的观察微小RNA(miRNA,miR)-4500通过转录后下调LIN-28同系物B(lin-28 homolog B,LIN28B)基因表达对乳腺癌细胞HCC1937迁移和增殖的抑制作用。方法采用实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测乳腺癌细胞系(MBMDA-468、MCF7、SKBR3、HCC1937)中miR-4500的表达。以miR-4500表达最低的乳腺癌细胞系(HCC1937)为对象,分别转染miR-4500模拟物和miR-NC,命名为miR-4500组和miR-NC组。real-time PCR检测转染效果。Transwell实验和噻唑蓝(MTT)实验检测转染后乳腺癌细胞迁移和增殖能力。生物信息学软件预测和双荧光素酶报告实验验证miR-4500的靶基因。realtime PCR和Western blot检测乳腺癌细胞中靶基因的表达。结果 miR-4500在乳腺癌细胞系的表达显著低于正常乳腺上皮细胞(P <0. 05),并在HCC1937细胞中表达最低(P <0. 01)。miR-4500组miR-4500的表达(11. 60±1. 08)显著高于miRNC组(1. 22±0. 48),差异有统计学意义(P <0. 01)。与miR-NC组比较,miR-4500组细胞迁移和增殖能力均显著降低(P <0. 05)。生物信息学软件显示miR-4500的靶基因是LIN28B。双荧光素酶报告实验证明miR-4500可靶向结合LIN28B基因(P<0. 05)。与miR-NC组比较,miR-4500组HCC1937细胞中LIN28B的表达显著降低(P <0. 05)。结论 LIN28B基因是miR-4500的靶基因,miR-4500可通过转录后下调LIN28B基因表达抑制乳腺癌细胞HCC1937的迁移和增殖能力。
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单位湖北医药学院; 襄阳市第一人民医院