F磁珠对血液样本中EB病毒的富集方法

作者：郑皓; 卢金星; 陈小萍^*

来源：中华实验和临床病毒学杂志, 2023, 37(05).

• F磁珠
• EB病毒检测
• M磁珠

目的设计表达一种全新的重组蛋白(重组Ficolin-2蛋白, F蛋白)并包被磁珠, 实现多种抗凝血中EB病毒的富集效果。方法通过体外基因合成重组F蛋白基因片段, 该片段包括人IL-2信号肽、his标签、人IgG1 Fc、人Ficolin-2颈区及纤维蛋白原样区域(fibrinogen-like domain, FGD);并整合进表达质粒pCDNA?3.1(+)载体中, 通过转染HEK293F细胞, 实现上清中的分泌表达;通过镍柱纯化蛋白后包被到蛋白A磁珠上构建F磁珠;最后, 收集三种不同抗凝剂(分别为ETDA、肝素、柠檬酸钠)抗凝的临床EB病毒血样本, 并且比较了F磁珠和课题组前期开发的重组甘露聚糖结合凝集素磁珠(M磁珠)对三种抗凝剂抗凝血液中EB病毒富集的效果。结果 M磁珠对肝素和柠檬酸钠抗凝血液中EB病毒富集效果均较好(P<0.01), 但是对EDTA抗凝血EB病毒没有富集作用;而F磁珠对三种抗凝血中EB病毒的富集效果均较好(P<0.01)。结论 F磁珠可以实现多种抗凝血中EB病毒的富集作用。

• 单位
  传染病预防控制国家重点实验室; 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所