悬浮生长的人脐血细胞中Nestin及MAP_2 mRNA的表达

作者：鄢文海; 刘计荣; 王建枝; 邢莹; 许燕; 韩雪飞; 曹孟德

来源：郑州大学学报(医学版), 2004, (04): 592-595.

DOI：10.13705/j.issn.1671-6825.2004.04.016

• 脐血细胞
• 神经干细胞
• Nestin
• 微管相关蛋白-2

目的 :探讨悬浮生长的人脐血细胞中神经元特有标志物的表达特性 ,进一步阐明脐血单个核细胞(MNCs)向神经细胞分化的条件和机制。方法 :取健康自然分娩产妇脐血 ,密度梯度离心法分离单个核细胞 ,以 1×1 0 6ml-1 细胞密度接种于含体积分数为 2 0 %胎牛血清的DMEM培养瓶内 ,置 37℃、体积分数为 5 %CO2 、饱和湿度的培养箱内培养 ,倒置显微镜下观察细胞形态变化。收集培养第 1d、3d、5d、7d、1 0d悬浮生长的细胞 ,用RT PCR法检测培养前后MNCs神经元特有标志物Nestin和MAP2 的mRNA的表达。结果 :培养前MNCs呈小圆形 ,Nestin、MAP2mRNA均表达阳性。培养后细胞体积增大 ,部分细胞贴壁生长 ,部分细胞呈悬浮生长。收集悬浮生长细胞 ,第 1d、3dNestinmRNA的表达升高 ,随后降低直至转阴 ,而MAP2 mRNA的表达随培养时间的延长而增强。结论 :悬浮生长的脐血细胞表达神经元特有标志物Nestin和MAP2 mRNA ,随培养时间延长前者表达减弱而后者表达增强

• 单位
  华中科技大学同济医学院; 基础医学院; 郑州大学