逆转骨肉瘤耐药的实验研究

作者：黄丽红; 秦迪; 徐为民; 高奕瑶; 王岩^*

来源：中国实验诊断学, 2021, 25(11): 1697-1701.

• LIMK1
• 耐药
• 骨肉瘤

目的构建骨肉瘤耐药细胞,探讨LIMK1(LIM Kinase1)逆转骨肉瘤耐药的作用及机制。方法通过长春新碱(VCR)诱导建立人成骨肉瘤MG63的耐药细胞亚系,应用半数抑制浓度公式计算IC50值及耐药指数评估细胞的耐药性;CCK-8法检测细胞增殖抑制率;相差倒置显微镜观察耐药细胞细胞形态的改变;PT-PCR实验检测耐药基因MDR1及其相关基因LIMK1的表达;转染pSUPER-LIMK1重组质粒,验证沉默LIMK1基因逆转MG63耐药的作用并分析其机制。结果本研究所构建的耐药细胞的耐药指数为7.01,属中度耐药;MG63细胞排列规则,大小均一,以短梭形和多边形为主,而耐药细胞则大小不一、呈不规则排列,长梭型较多、两极可见伪足;耐药细胞的MDR1基因表达上调,与LIMK1基因表达正相关,沉默LIMK1基因后显著下调MDR1基因表达,同时显著增加了耐药细胞对长春新碱的敏感性。结论成功构建了骨肉瘤MG63耐药细胞,验证了LIMK1基因沉默后对骨肉瘤耐药的逆转作用;为逆转肿瘤耐药研究奠定了实验基础。

• 单位
  吉林大学中日联谊医院