人诱导多能干细胞向血管内皮细胞分化方法的建立

作者：杨建昌; 刘慧; 刘莉

来源：贵阳医学院学报, 2014, 39(06): 861-864.

DOI：10.19367/j.cnki.1000-2707.2014.06.021

• 甲基乙二酰氨基乙酸
• 多能干细胞
• 诱导分化
• 血管内皮细胞
• 血管内皮细胞生长因子

目的:建立一种新的促进人诱导多能干细胞(i PSc)向血管内皮细胞(VEC)分化的方法。方法:将未分化的人i PSc制备成拟胚体(EBs),分为常氧组(A组)、常氧加血管内皮生长因子(VEGF)组(B组)、常氧加甲基乙二酰氨基乙酸(DMOG)组(C组)、缺氧组(D组)、缺氧加VEGF组(E组)及缺氧加DMOG组(F组),分别给予相应处理;观察各组i PS-EBs分化的VEC形态结构,应用逆转录PCR(RT-PCR)法检测VEC特异基因CD31、CD34、VE-cad、KDR、v WF的表达,免疫荧光细胞法检测以mRNA表达最强组的VEC特异基因在细胞定位情况判断VEC分化情况。结果:RT-PCR结果显示未经诱导i PSc不表达任何VEC相关基因,A组EBs细胞仅表达微弱的VE-cad和KDR;经条件诱导后i PS-EBs细胞表达CD31、CD34、VE-cad、KDR、v WF,C组表达最强,与其他各组比较差异有统计学意义(P<0.05);免疫荧光结果显示C组中CD31、CD34为膜表达,KDR、v WF为胞浆表达。结论:常氧状态下加入DMOG培养能成功促进人i PSc向VEC分化。

• 单位
  贵阳市第一人民医院; 十堰市太和医院