摘要
目的:探讨血红素加氧酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)在造影剂所致肾小管上皮细胞损伤中的作用。方法:体外培养的HK-2细胞,分为正常对照组、甘露醇对照组、造影剂损伤组、钴原卟啉(CoPP)处理组、锌原卟啉(ZnPP)处理组。比色法测定细胞培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)水平,四甲基偶氮唑(methyl thiazolyltetrazolium,MTT)法测定细胞增殖活力,DCFH-DA荧光探针测定细胞内活性氧(ROS),硫代巴比妥酸法测定细胞内丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物岐化酶(SOD)活性,RT-PCR测定细胞HO-1mRNA表达,Western blot检测细胞HO-1蛋白表达。结果:造影剂碘海醇100mgI/ml可明显抑制HK-2细胞增殖、引起培养液中LDH水平上升、促使细胞内ROS含量增高、MDA含量上升而SOD活性下降,同时诱导HO-1mRNA和蛋白表达上调。与造影剂损伤组相比,HO-1诱导剂CoPP处理组,在引起HO-1表达升高的同时,HK-2细胞增殖增高、培养液LDH水平下降、细胞内ROS含量降低、MDA含量下降而SOD活性上升。HO-1抑制剂ZnPP处理组,在引起HO-1表达下降的同时,HK-2细胞增殖下降、培养液LDH水平升高、细胞内ROS含量减少、MDA含量升高而SOD活性下降。结论:HO-1对造影剂所致肾小管上皮细胞损伤具有明显的保护作用,其作用机制与抑制细胞内氧化应激反应有关。
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单位上海交通大学医学院附属新华医院