基于碳量子点的水果中β-葡萄糖苷酶活性测定方法研究

作者：李博聪; 黄高; 苏柯; 李俊丽; 闫新雨; 何梦瑶; 江秀明; 何丽君; 向国强^*

来源：河南工业大学学报(自然科学版), 2023, 44(01): 82-88.

DOI：10.16433/j.1673-2383.2023.01.011

• 茶汤
• 碳量子点
• β-葡萄糖苷酶
• 酶活性
• 对硝基苯酚

荧光法测定β-葡萄糖苷酶(β-D-glucosidase,β-Glu)活性具有简单、灵敏的特点，探索荧光法测定β-Glu活性的新方法具有重要意义。以茶汤(柑普茶)为碳源，通过自放热反应快速制备碳量子点(carbon dots, CDs),以其为荧光探针，基于荧光内滤效应建立了β-Glu活性的新方法。结果表明：所制备的CDs具有类石墨结构，粒径约4.5 nm,主要含有C、O、N等元素；CDs的最佳激发波长320 nm,最佳发射波长385 nm。将对硝基苯酚(p-nitrophenol,p-NP)加入CDs溶液中，能引起CDs的荧光强度明显降低，且CDs荧光猝灭程度lg(I0/I)与p-NP浓度呈线性关系，基于此建立了一种定量分析p-NP的方法。利用对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(p-NPG)在β-Glu催化作用下产生p-NP,通过荧光猝灭作用测定p-NP浓度可间接测定β-Glu活性。该方法的检出限为0.074 U/L,线性范围0.1～20 U/L。研究发现，CDs的发射谱带(385 nm)与p-NP在400 nm处的吸收峰有较大光谱重叠，且CDs的荧光寿命在加入p-NP后没有明显的变化，表明p-NP对CDs的荧光猝灭机理为内滤效应。实际样品分析表明该方法简便、快速、灵敏，可应用于水果中β-Glu活性的测定。

• 单位
  化学化工学院; 河南工业大学