致敏性CD4+T细胞来源的外泌体介导心肌梗死后心肌重构的机制研究

作者：赵芯晨; 王晶^*; 何婧瑜; 田欣; 朱丹丹; 王娇阳; 蔡利栋

来源：中华危重病急救医学, 2021, 33(11).

• 心肌梗死
• CD4+ T细胞
• 心肌纤维化
• 外泌体

目的研究致敏性CD4+ T细胞在心肌梗死(心梗)后心肌重构中的作用。方法①体外实验:提取原代小鼠脾脏CD4+ T细胞, 用CD3/CD28抗体处理48 h后, 超高速离心并提取细胞上清液中的外泌体。将致敏性CD4+ T细胞来源的外泌体与心肌成纤维细胞共同孵育48 h, 利用细胞增殖及细胞毒性检测实验(CCK-8)、Transwell实验及免疫荧光实验检测致敏性CD4+ T细胞来源的外泌体对心肌成纤维细胞增殖、迁移及分化的影响。②体内实验:利用随机数字表法将40只雄性C57小鼠分成对照组(Ctrl组)、假手术组(Sham组)、心梗组(MI组)、外泌体处理组(MI+Exo组), 每组10只。采用结扎冠状动脉左前降支复制小鼠心梗模型。MI+Exo组于制模后尾静注射外泌体40 μg/d。术后4周, 用心脏超声、定量聚合酶链反应(qPCR)评估致敏性CD4+ T细胞来源的外泌体对小鼠心功能状态及心脏纤维化程度的影响。结果①体外实验:致敏性CD4+ T细胞来源的外泌体可以显著增加心肌成纤维细胞增殖、迁移及分化能力〔细胞增殖(A值):0.31±0.01比0.21±0.01, 迁移能力(个/MP):79.20±3.34比48.80±2.13, 分化能力(α-平滑肌肌动蛋白, α-SMA;荧光强度):1.56±0.03比1.00±0.02, 均P<0.05〕。②体内实验:致敏性CD4+ T细胞来源的外泌体可加速心梗后心功能的恶化, 表现为:与MI组比较, MI+Exo组左室射血分数(LVEF)及短轴收缩率(FS)显著下降〔LVEF:0.185±0.008比0.257±0.022, FS:(9.72±1.72)%比(14.08±1.08)%, 均P<0.05〕, 左室舒张期末内径(LVEDD)及左室收缩期末内径(LVESD)显著增加〔LVEDD(mm):5.43±0.29比4.62±0.35, LVESD(mm):4.94±0.12比3.69±0.29, 均P<0.05〕。另外, qPCR结果显示, 致敏性CD4+ T细胞来源的外泌体具有促进心梗后心肌纤维化的发生, 表现为:MI+Exo组α-SMA、胶原(Col1a1、Col3a1)的mRNA表达显著高于MI组〔α-SMA(2-ΔΔCT):4.72±0.89比3.58±0.78, Col1a1(2-ΔΔCT):6.59±0.56比4.23±0.42, Col3a1(2-ΔΔCT):13.40±1.03比4.96±0.36, 均P<0.05〕。结论致敏性CD4+ T细胞来源的外泌体具有显著加速心梗后心肌病理性重构的作用。

• 单位
  首都医科大学宣武医院