摘要

目的观察温肾填精方及其拆方对肾阳虚证不孕小鼠生殖功能的影响。方法采用冰羟基脲灌胃法制备肾阳虚不孕小鼠模型,中药干预15d后灌胃给予PMSG5IU+HCG5IU进行超促排卵,合笼观察子代,计算获卵数,检测血清cAMP、cGMP、ATP、NO水平,JC-1荧光染色后激光共聚焦显微镜观察卵母细胞△Ψm,HE染色观察卵巢各级卵泡数,qPCR检测卵母细胞Mfn1、OPA1、Drp1、Fis1mRNA表达。结果模型组小鼠无法产出子代;获卵数减少、异常卵增加;血清cAMP下降、cGMP增高;ATP合成减少,NO增加;△Ψm降低;卵巢原始卵泡减少,闭锁卵泡增加,卵子Mfn1 mRNA、OPA1mRNA表达降低,Drp1 mRNA、Fis1 mRNA表达增加。与模型组比较,各中药组小鼠受孕结局均有所改善,提高ATP水平,纠正cAMP、cGMP,提升获卵数及优卵率趋势更优,并且资冲颗粒组降低NO水平、异卵数趋势更优;温肾填精复方对线粒体动力学状态调节、提升△Ψm,增加原始卵泡数目、减少闭锁卵泡数目趋势更优。结论温肾填精复方及其拆方均可不同程度纠正肾阳虚不孕小鼠生殖功能,与拆方比较,复方在调节小鼠卵母细胞线粒体动力学状态方面更优,可恢复线粒体功能,增强能量代谢,最终提升卵母细胞质量,改善卵巢储备,增加受孕率。