牛星状病毒和牛诺如病毒双重PCR检测方法的建立及应用

作者：王文佳; 邓廷贤; 徐照学; 张彬; 孟红丽; 王亚州; 兰亚莉^*; 师志海^*

来源：中国预防兽医学报, 2020, 42(08): 786-790.

• 牛星状病毒
• 牛诺如病毒
• 犊牛腹泻
• 双重PCR

为建立能同时快速检测牛星状病毒(BAstV)和牛诺如病毒(BNoV)的方法,本研究根据BAstV ORF1a基因和BNoV RdRp基因设计了2对特异性引物,通过优化反应条件,建立了能够同时检测BAstV和BNoV的双重PCR方法。特异性试验结果显示,该方法对牛轮状病毒等5种犊牛腹泻常见病原的扩增结果均为阴性,仅BAstV和BNoV扩增结果为阳性,特异性较强;敏感性试验结果显示,该方法对BAstV和BNoV重组质粒的最低检测限分别为1.09×103拷贝/μL和1.42×103拷贝/μL,敏感性较高;批内和批间试验结果一致,该方法重复性好。利用该方法和各病原单一PCR方法同时对221份河南省犊牛腹泻粪便样品进行检测,BAstV和BNoV的阳性检出率分别为18.1%和9.96%,两种方法符合率为100%。本研究在国内首次建立了检测BAstV和BNoV的双重PCR方法,其特异性强,敏感性高,重复性好,为BAstV和BNoV的鉴别检测及其分子流行病学调查提供了技术支持。

• 单位
  广西壮族自治区水牛研究所; 河南省农业科学院; 河南牧业经济学院; 医药学院