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摘要
目的探讨核因子(NF)-κB信号通路在异基因骨髓移植(allo-BMT)后并发肝静脉闭塞病(HVOD)中的作用。方法选择50只810周龄雄性BALB/c(H-2Kd)小鼠作为研究对象。小鼠经致死剂量全身照射(TBI)预处理后,根据移植方案不同,将其分为骨髓移植(BMT)组(n=20)和骨髓联合内皮祖细胞(EPC)移植组(EPC组)(n=20);另设TBI对照组(n=5)和正常对照组(n=5)(实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准)。于移植后7 d、15 d和33 d,检测移植后受鼠肝功能及血清肿瘤坏死因子(TNF)-α及白细胞介素(IL)-6水平。受鼠肝脏组织经苏木精-伊红(HE)染色法及Masson染色法染色后,光镜下观察小鼠肝脏的病理改变。荧光定量聚合酶链反应及Western免疫印迹法(WB)法检测受鼠肝细胞内NF-κB信号通路的活化情况。结果①移植后,EPC组受鼠与BMT组相比,天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶和总胆红素水平明显降低,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。②移植后第7天,EPC组受鼠TNF-α表达量为(138.73士10.42)pg/mL,显著高于BMT组的(95.31土19.09)pg/mL,两组相比,差异有统计学意义(t=6.907,P<0.05),而IL-6的表达量为(169.50±10.21)pg/mL,低于BMT组的(215.01±22.13)pg/mL,两组比较,差异有统计学意义(t=-6.372,P<0.05);第15天EPC组受鼠的IL-6水平升高至(201.49士14.97)Pg/mL,明显高于BMT组的(151.51士26.43)pg/mL,两组比较,差异有统计学意义(t=5.51,P<0.05)。③移植后第33天,EPC组受鼠转化生长因子(TGF)-β、CXCL2、CCL2和CCR2水平均较BMT组明显降低,两组上述各项指标比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。④移植后小鼠肝细胞内NF-κB信号通路相关分子IKKβ于移植后第15天达峰值。IKKβ的活化、IκBα的磷酸化及P65的活化水平与IKKβ的表达水平一致。结论 allo-BMT并发HVOD受鼠早期肝细胞内NF-κB信号通路的活化,可促进损伤肝细胞的修复,但在肝细胞修复后,NF-κB信号通路的持续活化可促进肝纤维化。
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单位徐州医科大学; 徐州医学院附属医院
