一种适用于玉米胚乳DNA提取的新方法

作者:赵紫薇; 任洁; 刘亚维; 葛建镕; 田红丽; 施昕晨; 朱万豪; 马世鹏; 孙铭勖; 朱少喜; 张茗起; 王凤格*
来源:分子植物育种, 2023, 1-10.

摘要

由于玉米胚乳中含有大量淀粉、蛋白质等物质,从胚乳中提取高质量的DNA较为困难。针对这一问题,本研究将磁珠法和蛋白酶K相结合,并以‘京科968’、‘京724’、‘京92’作为实验材料,探索一种高质量及高稳定性的胚乳DNA提取方法。结果表明,1.5% SDS裂解液中含有100 μg/mL的蛋白酶K,并在75 ℃条件下水浴15 min时提取胚乳DNA效果最好。与试剂盒法提取的DNA相比,磁珠-蛋白酶K法提取的胚乳DNA浓度高,均一性好。在KASP平台上,胚乳DNA的基因分型结果与相同样品的叶片DNA基因分型结果一致,说明磁珠-蛋白酶K法提取的玉米胚乳DNA可以应用于基因分型的研究。磁珠-蛋白酶K法是一种适用于胚乳DNA提取的方法,可为大规模样品通过胚乳DNA筛选基因型的研究提供技术支持。