靶向ANG-2的shRNA重组载体抑制人子宫内膜癌Ishikawa生长和侵袭的研究

作者：周怀君; 何荣荣; 夏宝妹; 寻庆英; 潘金顺; 胡娅莉

来源：中华医学遗传学杂志, 2009, (03): 249-253.

• RNA干扰
• 血管生成素-2
• 子宫内膜癌
• Ishikawa细胞
• 基因治疗

目的探讨采用RNA干扰(RNA interference,RNAi)抑制血管生成素-2(angiopoietin-2,ANG-2)基因的表达对人子宫内膜癌细胞Ishikawa细胞的影响。方法采用脂质体Lipofectamine~(TM)2000介导的方法将针对ANG-2基因的短发卡状RNA(short hairpi RNA,shRNA)表达载体转染到人子宫内膜癌Ishikawa细胞中,逆转录聚合酶链反应及Western印迹法检测ANG-2mRNA及蛋白的表达;噻唑蓝比色法检测Ishikawa细胞的增殖;荧光显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;侵袭实验检测其对侵袭能力的影响。结果人子宫内膜癌Ishikawa细胞ANG-2mRNA及其蛋白质表达水平均显著降低;增殖被抑制,抑制率63.11%;细胞凋亡增加,细胞凋亡率与空白对照组和阴性对照组相比明显增高;细胞生长减慢,阻滞于G_1期的增多,S期细胞减少;侵袭能力明显下降。结论靶向ANG-2的shRNA能成功下调ANG-2基因的表达,抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞生长和侵袭。

• 单位
  东南大学; 南京中医药大学; 南京大学医学院附属鼓楼医院; 第一临床医学院