目的构建以泛醌启动子(PUB)驱动绿色荧光蛋白(GFP)表达的慢病毒载体三质粒表达系统,并建立其包装细胞系获得GFP的表达.方法载体的构建采用限制性内切酶酶切、T4DNA连接酶连接等方法.三质粒系统中,转移质粒含PUB启动子及标志基因GFP,包装质粒为△NRF,内含CMV启动子和来自胰岛素基因的Poly(A)位点,包膜蛋白质粒编码水疱性口炎病毒G糖蛋白(VSV-G).载体构建成功后,用磷酸钙