嗜水气单胞菌溶血素A表达、免疫原性及活性检测

作者：赵秀敏; 高勤学; 陈鸿军; 韩先干; 丁铲

来源：中国动物传染病学报, 2011, (01): 45-50.

• 嗜水气单胞菌
• 溶血素
• 克隆
• 表达
• 大肠杆菌 Aeromonas hydrophila
• hemolysin
• cloning
• expression
• E.coli

根据已发表的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)溶血素A基因序列设计一对特异性引物,以TPS30菌株基因组为模板,通过PCR扩增溶血素A基因,经T-A克隆、序列测定和分析,结果表明,该基因包含1482 bp碱基,编码494个氨基酸。将溶血素A定向克隆至表达载体pET32a( )中,构建重组表达质粒pET-THA,在IPTG诱导下成功获得重组表达蛋白His-GroEL,大小为68 kDa。对该质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达特性分析表明,最佳的诱导表达条件为:在0.1 mmol/L的IPTG浓度下,21℃诱导表达3 h。表达的溶血素A蛋白纯化后免疫小鼠,经Wes...

• 单位
  中国农业科学院上海兽医研究所; 江苏农牧科技职业学院; 河南农业职业学院