DMT1第四功能区腺病毒表达载体的构建及其功能的初步研究

作者：王蕾; 姜宏; 徐华敏; 罗兵; 谢俊霞

来源：脑与神经疾病杂志, 2007, 15(4): 286-290.

DOI：10.3969/j.issn.1006-351X.2007.04.018

• DMT1
• 第四功能区
• 腺病毒载体

目的:构建携带DMT1第四功能区基因的重组腺病毒表达载体,并对其功能进行初步探讨.方法:采用AdEasy系统构建携带DMT1第四功能区基因的重组腺病毒载体pAd-DMT1-4,脂质体法转染人胚肾293细胞,包装产生重组腺病毒vAd-DMT1-4.vAd-DMT1-4感染C6胶质瘤细胞后,采用RT-PCR检测目的基因表达,用铁孵育感染重组腺病毒的靶细胞后,测定C6胶质瘤细胞内OH·和MDA含量.结果:PCR、序列测定以及限制性酶切证实vAd-DMT1-4基因正确插入穿梭质粒,并与病毒骨架质粒pAdEasy-1重组,重组腺病毒表达载体构建成功.经293细胞包装获得具有稳定感染性的重组腺病毒vAd-DMT1-4,感染重组腺病毒的C6胶质瘤细胞DMT1-4表达增加.用铁孵育感染重组腺病毒的靶细胞后,C6胶质瘤细胞内OH·和MDA含量有增高的趋势.结论:重组腺病毒vAd-DMT1-4可有效感染C6胶质瘤细胞.

• 单位
  青岛大学