重组人白细胞介素-12(CHO细胞)的纯化及其活性

作者:赵峰; 罗慧娟; 叶倩君; 张霞; 张桂铃; 王兴勇; 张宜俊
来源:中国生物制品学杂志, 2009, (11): 1117-1121.
DOI:10.13200/j.cjb.2009.11.75.zhaof.018

摘要

目的建立CHO细胞表达的重组人白细胞介素-12(rhIL-12)的纯化工艺,并检测纯化的rhIL-12的生物活性。方法取高效表达rhIL-12的CHO工程细胞培养上清液,采用层析结合硫酸铵沉淀的方法进行分离纯化,ELISA法测定目的蛋白的含量,并计算回收率;SDS-PAGE、SEC-HPLC和Westernblot对纯化样品进行鉴定;以PBMCIFNγ诱生法检测纯化rhIL-12的生物活性。结果纯化的rhIL-12的总回收率为56.4%;经SEC-HPLC检测,其纯度达99.2%;SDS-PAGE分析显示,两个亚基的相对分子质量分别与理论值(40000和35000)相符;Westernblot...

全文