摘要
目的:探讨硫链丝菌肽(thiostrepton,TST)抑制鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞CNE-2中叉头框M1(forkhead box M1,Fox M1)表达后凋亡作用的增强及可能机制。方法:细胞培养传代后过夜培养,将细胞分为3组:对照组未加TST、只加0.1%二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)的培养液,4μmol/L TST组,8μmol/L TST组,培养48 h后,进行不同的实验手段观察处理。显微镜下观察TST作用CNE-2后细胞形态学改变;Hoechst33342染色后显微镜下计数凋亡细胞个数,检测TST对CNE-2细胞凋亡的影响;流式细胞术检测TST作用CNE-2细胞后,细胞凋亡率的变化;Western blot检测TST作用CNE-2后细胞中Fox M1及凋亡相关蛋白的表达变化。结果:TST作用CNE-2细胞后细胞形态逐渐向凋亡发展,呈剂量依赖性;Hoechst33342染色检测凋亡结果显示各组凋亡细胞数为:对照组(0.1%DMSO),4μmol/L TST组和8μmol/L TST组细胞凋亡数目分别为:0.60±0.55,3.60±0.89,7.00±1.58,TST对CNE-2细胞凋亡的影响呈剂量依赖性增加,对照组与TST组比较差别有统计学意义(F=42.72,P<0.01);流式细胞术检测凋亡结果显示:对照组(0.1%DMSO)(1.87±0.74)%;4μmol/L TST组(10.55±0.75)%;8μmol/L TST组(19.35±2.49)%,随着TST浓度增加,CNE-2细胞凋亡率增加,对照组与TST组比较差别有统计学意义(F=94.50,P<0.01);Western blot检测发现TST作用CNE-2后细胞中Fox M1蛋白表达下降,凋亡相关蛋白表达发生变化。结论:硫链丝菌肽在体外可以有效降低NPC CNE-2细胞中Fox M1表达,并抑制NPC CNE-2细胞生长,诱导其凋亡。
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单位重庆市中医院; 重庆医科大学附属第一医院