外泌体对SH-SY5Y细胞缺氧再灌注损伤的影响

作者：柴毅; 范阳华; 纪晨星; 吕世刚; 吴淼经; 叶敏华; 肖兵; 徐斌; 祝新根

来源：中华神经医学杂志, 2017, 16(10): 1009-1015.

• 外泌体
• 脑卒中
• 缺血再灌注损伤
• 神经保护

目的探讨外泌体对人神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y)缺氧再灌注损伤的影响。方法构建人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)缺氧再灌注损伤(HUVEC I/R)模型,从中提取外泌体并予以鉴定。构建SH-SY5Y细胞缺氧再灌注损伤(SH-SY5YI/R)模型并分为2组,其中外泌体组于再灌注同时予以外泌体刺激,对照组于再灌注同时予以无外泌体血清培养基培养。采用CCK8法检测2组细胞培养24h、48 h、72 h时细胞活力,采用Hochest33258染色检测细胞凋亡情况,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况及细胞周期,采用划痕实验、Transwell侵袭实验分别检测细胞迁移能力和侵袭能力,采用RT-qPCR、Western blotting检测细胞中Caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA和蛋白表达。结果与对照组比较,外泌体组细胞培养48h、72h时细胞活力明显提高(48h:0.70±0.05 vs 0.94±0.08;72h:0.83±0.05 vs 1.02±0.06),G0/G1期细胞比例明显降低(71.26%±5.24%vs 66.87%±4.23%),S期细胞比例明显增高(14.39%±4.11%vs 20.54%±3.46%),相对划痕损伤面积明显减少(0.61±0.07 vs0.52±0.10),穿膜细胞数量明显增多(44.00±6.56vs 70.67:±6.11),细胞中Bax、Caspase-3 mRNA表达水平明显降低、Bcl-2mRNA表达水平明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 HUVECI/R模型来源外泌体可在SH-SY5Y细胞缺氧再灌注损伤后发挥神经保护作用。

• 单位
  南昌大学第二附属医院