PEX基因转染人脐带间充质干细胞的体外培养及鉴定

作者：谢炯; 戚继^*

来源：医学信息(上旬刊), 2023, 36(10): 88-97.

• 人脐带间充质干细胞
• 胶质瘤
• PEX基因

目的 构建PEX基因真核表达载体并成功转染人脐带间充质干细胞（HuMSCs），探讨PEX基因修饰HuMSCs的可行性。方法 采用全贴壁细胞分离法培养HuMSCs，流式细胞技术鉴定其表面标记物；分子克隆技术构建PEX基因真核表达载体[PEX-pcDNA3.1（+）]，重组质粒PEX-pcDNA3.1（+）转染HuMSCs，验证真核表达载体在HuMSCs中的表达。结果(1)P5代HuCMSCs表面分子标志物结果 显示各代均表达间充质干细胞标志CD73、CD90和CD105，而不表达造血干细胞标志CD11b、CD19、CD34、CD45和组织相容抗原HLA-DR；(2)RT-PCR检测显示，目的基因PEX位于DNA Maker 500～750 bp的特异性条带；抽提质粒后双酶切鉴定显示，重组质粒PEX-pcDNA3.1（+）位于DNA Maker 5000 bp的特异性条带，且重组质粒PEX-pcDNA3.1（+）双酶切后位于DNA Maker 500～750 bp和5000 bp两条特异性条带；菌液测序结果证实，质粒载体PEX-pcDNA3.1（+）构建成功；重组质粒PEX-pcDNA3.1（+）在HuMSCs中高表达。结论 构建的PEX-pcDNA3.1（+）真核表达载体可用于转染HuMSCs，为进一步探讨其在胶质瘤治疗中的作用奠定了基础。

• 单位
  北京丰台医院