E-box元件在p21基因表达调控中作用的研究

作者：孙荣距; 夏照帆; 杨宗城; 姚咏明; 赵晓东; 苏踊跃; 罗向东

来源：感染.炎症.修复, 2008, (02): 90-93.

• p21
• E-box元件
• 报告基因

目的:通过p21基因调控序列E-box位点的突变分析,研究E-box位点对p21基因表达调控的作用。方法:将人野生型p21基因启动子全长序列构建到荧光素酶报告基因载体pGL3-basic,并进一步对重组载体pGL3-p21p启动子E-box位点做定点突变,构建突变载体E1、E2、E3,分别转染人脐静脉血管内皮细胞株(ECV304细胞),DLR系统测定荧光素酶活性,并观察E-box位点突变前后荧光素酶活性变化。结果:测序结果表明野生型pGL3-p21p及突变载体E1、E2、E3构建成功。野生型pGL3-p21p荧光素酶活性(105.82±16.55)明显高于空载体pGL3-basic(1.56±0.62);突变载体E1、E2、E3的荧光素酶活性(70.71±16.46、37.87±3.26、83.25±11.48)较野生型载体不同程度下降(P<0.01)。结论:p21基因启动子某些E-box位点参与了p21基因的表达调控。

• 单位
  中国人民解放军第二军医大学; 解放军总医院; 西南医院; 长海医院; 第三军医大学