摘要

目的研究质粒表达型shRNA对CHL-3A4转基因细胞系细胞色素P4503A4基因表达的抑制作用。方法设计并构建3条shRNA真核表达载体(CYP3A4Ⅰ、CYP3A4Ⅱ、CYP3A4Ⅲ),转染CHL-3A4转基因细胞,以空载体组及无关序列的shRNA表达载体组为阴性对照;转染后48h,Westernblotting观察RNA干扰对CYP3A4蛋白表达的影响;RNA干扰后,用HPLC法测定CHL-3A4转基因细胞的硝苯地平氧化酶的活性。结果CYP3A4Ⅲ表达载体能显著抑制CYP3A4蛋白表达(75%),抑制硝苯地平氧化酶的活性。结论RNA干扰能抑制CYP3A4基因表达。