科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
为建立一种针对牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinortracheitis virus,IBRV)和牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)的双重PCR检测方法，根据GenBank中IBRV gB(UL27)和BVDV 5’-UTR基因序列分别合成特异性引物，优化反应条件，建立了能够同时检测IBRV和BVDV的双重PCR方法，并对其特异性、敏感性、重复性进行了测试。结果显示：该方法对IBRV、BVDV和IBRV/BVDV可分别扩增出500、198、500/198 bp的特异性目标条带，对牛呼吸道合胞体病毒、牛冠状病毒、牛细小病毒、牛纽布病毒和牛支原体检测结果均为阴性；对混合液中IBRV、BVDV的最低检测限分别为104和103 copies/μL;3次重复性试验结果一致。采用建立的方法对79份临床可疑牛血清样品进行IBRV、BVDV和IBRV+BVDV检测，阳性率分别为12.66%、17.72%和8.86%，与IBRV和BVDV单重PCR检测结果符合率分别为90.00%和93.33%，两种病原混合感染的阳性符合率为100%。结果表明，本研究建立的IBRV和BVDV双重PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性及重复性，为兽医临床快速诊断IBRV和BVDV提供了一种方便、快捷的分子生物学检测手段。
- 单位
