识别乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的嵌合抗原受体NK92MI细胞的制备

作者：董莎莎; 黄敏; 李冬冬; 高宇; 李正红; 刘传苗^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2021, 37(09): 788-793.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009269

• 乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)
• 嵌合抗原受体(CAR)
• NK92MI细胞
• 慢病毒

目的构建识别乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的嵌合抗原受体(CAR)慢病毒表达载体,并使其在NK92MI细胞表达,制备识别HBsAg的CAR-NK92MI细胞。方法根据单链抗体(scFv)的序列,设计并合成CAR,构建慢病毒表达载体,将其包装、浓缩、测定滴度。然后用浓缩的慢病毒感染HEK293T细胞、 Western blot法验证CD3ζ链的表达及在NK92MI细胞中的感染效率。结果成功构建识别HBsAg的CAR慢病毒表达载体,测得滴度≥107转导单位(TU)/mL。感染NK92MI细胞后,可表达CD3ζ蛋白。结论成功制备了识别HBsAg的CAR-NK92MI细胞。

• 单位
  生命科学学院; 蚌埠医学院; 蚌埠医学院第一附属医院