NGAL及自噬在大鼠肾脏缺血/再灌注损伤中的表达及意义

作者：张雅丽; 张敏; 邢晓英; 孙萌萌; 齐冉; 乔淑凯^*

来源：医学研究杂志, 2023, 52(11): 89-117.

• 缺血/再灌注
• 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白
• 自噬
• 凋亡

目的 明确大鼠肾脏缺血/再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)损伤后不同时间中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL)表达水平及肾组织自噬状态的变化情况及意义。方法 建立大鼠肾脏I/R损伤模型，将30只Wistar雄性大鼠按随机数字表法分为假手术组(Sham组)和I/R组，按照再灌注时间，将I/R组分为2h组、6h组、24h组和48h组。在上述不同时间点分别留取大鼠血、尿及肾组织标本。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunoadsordent assay, ELISA)检测血和尿中NGAL水平；全自动生化分析仪检测血尿素氮(blood urea nitrogen, BU)和血肌酐(serum creatinine, SCr)水平；苏木精-伊红染色法检测肾组织损伤程度并进行损伤程度积分；应用原位末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling, TUNEL)法检测肾小管上皮细胞凋亡情况；实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测自噬相关基因LC3及Beclin-1的表达。结果 血和尿中NGAL表达水平在I/R损伤后2h即开始升高，6h达到高峰，24h后呈下降趋势。BU及Scr在I/R损伤后6h开始升高，24h达到高峰。TUNEL阳性细胞于I/R损伤后6h开始增加，24h数量达峰值。苏木精-伊红染色显示，I/R损伤后各组均有不同程度的肾小管上皮细胞肿胀、坏死。从I/R损伤后6h开始，LC3和Beclin-1基因表达呈上升趋势，24h后LC3和Beclin-1基因表达量达高峰。结论 大鼠肾脏I/R损伤早期NGAL表达水平即升高，早于BU、SCr水平的变化，可以作为早期诊断肾脏I/R损伤的分子指标。大鼠肾脏I/R损伤加重过程中NGAL表达呈增加趋势，自噬被激活，提示NGAL蛋白及自噬均在I/R损伤过程中发挥一定的作用。

• 单位
  河北医科大学第二医院