摘要
目的:探究低氧状态下低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)对骨细胞凋亡的影响。方法 :用氯化钴(cobalt dichloride, CoCl2)刺激骨细胞系MLO-Y4建立体外低氧骨细胞培养体系。CCK-8实验检测CoCl2对MLO-Y4细胞增殖活性的影响;Hoechst 33 342及TUNEL染色检测CoCl2处理后的MLO-Y4细胞的凋亡情况;利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹(Western blot)和细胞免疫荧光检测CoCl2作用下MLO-Y4细胞表达HIF-1α与凋亡相关因子Caspase-3及Bcl-2的情况;检测HIF-1αsiRNA转染对MLO-Y4细胞表达HIF-1α和促凋亡相关因子Caspase-3的影响。结果:200μmol/L CoCl2作用24 h后,MLO-Y4细胞的增殖率显著下降,并呈浓度和时间依赖性。200μmol/L CoCl2作用24 h可上调MLO-Y4细胞HIF-1α的表达,并促进MLO-Y4骨细胞凋亡;siHIF-1α转染后,MLO-Y4细胞HIF-1α表达下降,促凋亡基因Caspase-3也表现为相同的下降趋势,骨细胞凋亡减少。结论:HIF-1α在体外化学模拟低氧条件下,可促进骨细胞凋亡。
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单位同济大学; 同济大学附属口腔医院