mir-375调节notch通路对高氧诱导新生鼠肺上皮细胞凋亡的影响研究

作者：黄润英; 范智利; 肖吉群; 郑巍; 蔡强^*

来源：河北医药, 2021, 43(17): 2565-2570.

• 微小RNA-375
• notch通路
• 高氧
• 新生鼠
• 肺上皮细胞凋亡

目的探讨微小RNA(mir)-375调节notch通路对高氧诱导支气管肺发育不良(BPD)新生鼠肺上皮细胞凋亡的影响。方法 80只出生后3 d大鼠随机分为对照组、模型组、mir-375阴性对照组和mir-375拮抗剂组,每组20只。除对照组外,其他3组置于氧浓度(70±5)%氧箱中24 h,对照组置于空气中正常饲养,24 h后mir-375阴性对照组注射2μl(浓度为0.5μg/μl)mir-375拮抗剂阴性对照和纳米转染复合物的混合物;mir-375拮抗剂组注射2μl(浓度为0.5μg/μl)mir-375拮抗剂和纳米转染复合物的混合物;对照组和模型组注射2μl无菌0.9%氯化钠溶液,大鼠建模7 d和14 d分别每组取10只,称重检测大鼠体重变化;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测大鼠肺组织中mir-375水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织形态学;TUNEL检测肺组织凋亡情况;免疫组化检测大鼠肺组织中notch1表达水平;硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)水平、氮蓝四唑光还原法测定超氧化物歧化酶(SOD)水平;蛋白免疫印迹(WB)检测肺组织B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(Bax)蛋白表达情况。结果建模7、14 d,对照组大鼠肺组织支气管完整且排列整齐,肺泡排列整齐;模型组与mir-375阴性对照组肺组织结构不完整,肺泡数量减少、体积增大,结构简单化;mir-375拮抗剂组肺组织结构有所改善,与模型组相比肺泡数量升高、体积减少(P<0.05)。与对照组相比,模型组、mir-375阴性对照组体重、肺组织中notch1水平、SOD水平、Bcl2蛋白水平降低(P<0.05),肺组织中mir-375水平、肺泡上皮细胞凋亡指数、MDA水平、Bax蛋白升高(P<0.05);分别与模型组、mir-375阴性对照组相比,mir-375拮抗剂组体重、肺组织中notch1水平、SOD水平、Bcl2蛋白水平升高(P<0.05),肺组织中mir-375水平、肺泡上皮细胞凋亡指数、MDA水平、Bax蛋白降低(P<0.05)。结论抑制mir-375可上调notch通路减轻氧化应激实现对BPD新生鼠肺上皮细胞凋亡的缓解,从而实现对大鼠的保护。

• 单位
  四川省宜宾市第二人民医院