在含有2,4-D的培养基上所诱导和增殖的枳棋体细胞胚只能形成无再生能力的畸形胚。通过次生胚发生途径可以在不加植物生长调节物质的培养基诱导出发育正常的体细胞胚,子叶期胚的次生胚诱导能力高于早期体胚。相对高的温度(30℃)有利于次生胚的诱导,相对低的温度(20℃)更有利于次生胚的发育、植株再生和移栽成活。