利用CAL-1-L929细胞建立一种抑制性寡聚脱氧核苷酸筛选体系

作者：孙然; 李春梅; 张永胜; 张乐宁; 时景伟

来源：中华实验外科杂志, 2018, 35(02): 326-327.

• 抑制性寡聚脱氧核苷酸
• Toll样受体配体
• CAL-1细胞
• 肿瘤坏死因子-α

目的利用树突状细胞CAL-1的肿瘤坏死因子-α(TNF-a)检测平台,以进一步应用于抑制性寡聚脱氧核苷酸的筛选。方法以含有未甲基化CpG基序的寡聚脱氧核苷酸CpG(CpG ODN)0800(3μg/ml作为刺激剂,将其作用CAL-1细胞(2×105个细胞/孔),48h后收集上清,作用于L929细胞(2×104个细胞/孔)。培养18h,加入水疱性口炎病毒(VSV),培养72h,检测570 nm处的吸光度值。结果筛选条件确定为CpG ODN 0800终质量浓度为3μg/ml,CAL-1上清液1:5倍稀释。L929细胞数在2×104个细胞/孔,反应时间为24h。应用此条件成功筛选出自行设计的抑制性ODN-SAT05f。结论建立实验体系,成功检测了自行设计的抑制ODN和CpG ODN诱导的CAL-1细胞的TNF-α的生物学活性。

• 单位
  吉林大学第一医院; 吉林省疾病预防控制中心; 吉林大学中日联谊医院