微小RNA-767-5p对胶质瘤细胞增殖、侵袭迁移和Wnt信号通路的影响

作者：高金勇; 陈克尚; 梁慧

来源：临床肿瘤学杂志, 2022, 27(08): 680-686.

DOI：10.3969/j.issn.1009-0460.2022.08.002

• 胶质瘤
• 微小RNA-767-5p
• MYCN
• 侵袭
• 迁移
• Wnt信号通路

目的 探讨微小RNA-767-5p(miR-767-5p)在胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭中的作用和潜在机制。方法 采用实时荧光定量PCR(q PCR)检测人星形胶质细胞(NHA)和胶质瘤细胞(LN229、A172、T98、U87)的miR-767-5p水平。选取miR-767-5p水平最低的胶质瘤细胞并分为空白对照组(未转染)、阴性对照组(转染miR-767-5p模拟物mimics的阴性对照序列)和过表达组(转染miR-767-5p mimics)，采用MTT法、划痕实验和Transwell小室实验检测miR-767-5p对U87细胞增殖、迁移和侵袭的影响;采用q PCR和Western blotting检测无翅型MMTV整合位点家族成员1(Wnt1)、β-连环蛋白(β-catenin)和myc原癌基因(c-Myc)的水平。通过双荧光素酶报告基因实验、q PCR和Western blotting验证miR-767-5p与原癌基因MYCN间的潜在靶向关系。结果 胶质瘤细胞的miR-767-5p水平高于NHA细胞(P<0.05)，鉴于U87细胞的miR-767-5p水平最低，故作为后续细胞实验研究对象。与空白对照组和阴性对照组相比，过表达组的miR-767-5p水平升高，而细胞活力、划痕愈合率和穿膜细胞数降低，差异有统计学意义(P<0.05);过表达组U87细胞的Wnt1、β-catenin、c-Myc和MYCN水平低于空白对照组和阴性对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组和阴性对照组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。miR-767-5p可能与MYCN mRNA的3’端非翻译区具有互补结合核苷酸序列。双荧光素酶报告基因实验结果显示，miR-767-5p mimics降低了野生型MYCN的荧光素酶活性(P<0.05)，而不影响突变型MYCN的荧光素酶活性(P>0.05)。结论 MiR-767-5p可能通过靶向负调控MYCN的来调控Wnt/β-catenin通路的信号传导，进而抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭过程，有望成为胶质瘤的潜在治疗靶点。

• 单位
  神经内科; 海南西部中心医院