基于转录组学探索瘀血痹片治疗类风湿关节炎滑膜炎症的作用机制

作者：张昕卓; 陶雪莹; 黄凤玉; 祝盼盼; 袁蓓; 陈沛萍; 孔祥英; 林娜^*; 苏晓慧^*

来源：中国中药杂志, 2023, 1-12.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20230915.402

• 瘀血痹片
• 类风湿关节炎
• 滑膜炎症
• 转录组学
• PI3K/Akt信号通路

基于转录组学分析瘀血痹片（Yuxuebi Tablets，YXB）治疗类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）滑膜炎症的机制。运用转录组学测序技术检测正常组、胶原诱导型关节炎（collagen-induced arthritis，CIA）模型组、YXB组大鼠关节组织的基因表达谱，共同差异表达基因进行基因功能注释（Gene Ontology，GO）、京都基因与基因组组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）富集分析。通过OMIM、GeneCards数据库检索RA滑膜炎症疾病的相关靶点；通过Venny 2.1平台对YXB作用靶点和RA滑膜炎症疾病靶点取交集，对交集靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析。运用免疫组化法检测大鼠关节组织中炎症因子白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）蛋白表达情况，并运用Western blot法检测磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路关键蛋白的表达水平。正常组vs模型组、模型组vs YXB组差异基因取交集得到明显差异基因2 058个。通过OMIM、GeneCards数据库检索RA滑膜炎症相关靶点1 102个，与YXB组明显差异基因取交集后得到204个交集靶点，主要涉及免疫反应（immune response）、信号传导（signal transduction）、炎症反应（inflammatory response）等生物过程，细胞质膜（plasma membrane）、细胞外间隙（extracellular space）、胞外区（extracellular region）等细胞组分，蛋白结合（protein binding）、相同蛋白结合（identical protein binding）、受体结合（receptor binding）等分子功能，主要富集到PI3K/Akt、细胞因子受体相互作用、Janus激酶/信号转导子和转录激活子信号通路（JAK/STAT）等信号通路。Western blot验证结果显示，YXB低、中、高剂量均能不同程度抑制大鼠关节组织中PI3K/Akt信号通路关键蛋白的表达水平（P<0.01），并呈现剂量依赖性。免疫组化进一步确认，YXB不仅能抑制CIA大鼠关节滑膜组织中炎症因子IL-1β和TNF-α水平（P<0.01），而且也能抑制p-Akt蛋白的表达。综上，该研究通过转录组学挖掘YXB抑制滑膜炎症缓解RA病情进展的关键机制，并通过系列验证发现与其抑制PI3K/Akt信号通路有关。

• 单位
  中国中医科学院中药研究所