白桦开花抑制因子BpFLC与BpSVP蛋白同源互作域筛选与分析

作者：郑唐春; 臧丽娜; 代丽娟; 杨传平; 曲冠证

来源：植物生理学报, 2015, 51(09): 1447-1456.

DOI：10.13592/j.cnki.ppj.2015.0116

• 白桦
• BpFLC
• BpSVP
• 酵母双杂交
• 截短体
• 蛋白互作

开花是植物由营养生长向生殖生长的转换点,该过程受内源基因与环境信号共同调控。FLC(Flowering locus C)和SVP(Short vegetative phase)是开花途径中关键的抑制开花因子。本文利用酵母双杂交技术深入研究白桦开花抑制因子FLC与SVP的自身聚合作用的分子机理。从重组质粒p GBKT7-BpFLC、p GBKT7-Bp SVP分别克隆出6个BpFLC截短体[BpFLC1(aa173)、BpFLC2(aa1173)、BpFLC3(aa74173)、BpFLC4(aa60208)、BpFLC5(aa74208)和BpFLC6(aa174208)]和6个BpSVP截短体[BpSVP1(aa168)、Bp SVP2(aa1172)、Bp SVP3(aa69172)、BpSVP4(aa60225)、BpSVP5(aa69225)和Bp SVP6(aa173225)],分别编码MADS型蛋白的MI、MIK、K、IKC、KC和C域。在酵母Y2HGold菌中,分别共转质粒pGBKT7-BpFLC16×pGADT7-BpFLC及p GBKT7-BpSVP×pGADT7-BpSVP16。酵母转化子Y2HGold[p GBKT7-BpFLC×p GADT7-BpFLC]、Y2HGold[pGBKT7-BpFLC25×pGADT7-BpFLC],可在选择性固体培养基TDO(SD/-Leu/-Trp/-His)、QTO/A(SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade/Ab A)上生长,并在QDO/A/X(SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade/AbA/X-α-gal)上长出蓝色菌落,表明BpFLC能与自身及截短体蛋白BpFLC25同源结合。此外酵母Y2HGold[pGBKT7-BpSVP×pGADT7-Bp SVP]、Y2HGold[pGBKT7-Bp SVP×p GADT7-BpSVP25]也能同时激活报告基因AUR1-C、HIS3、ADE2、MEL1,说明BpSVP能与自身及截短体蛋白BpSVP25同源结合。对保守区的序列结构进一步分析发现:BpFLC与BpSVP的K域是它们能够同源结合,介导BpFLC与BpSVP自身形成同源二聚体的关键。

• 单位
  东北林业大学; 林木遗传育种国家重点实验室