耻垢分枝杆菌精氨酸代谢变化对细菌毒力及肺上皮细胞线粒体功能的影响

作者：周紫薇; 林晨; 李烨雨; 王玉臣; 张鹭

来源：检验医学, 2022, 37(05): 472-476.

DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2022.05.015

• 耻垢分枝杆菌
• A549细胞
• argR
• 线粒体

目的 探讨精氨酸代谢变化对耻垢分枝杆菌(M.smeg)毒力、致病性及宿主生理的影响。方法 通过构建M.smeg argR敲除株,以野生型M.smeg为对照,测定细菌体外生长能力变化;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细菌脂类代谢相关基因fadD2、fadA5、kstR等的表达。用M.smeg侵染人非小细胞肺癌上皮细胞系A549,检测CCK8细胞活力,采用RT-qPCR检测细胞线粒体功能相关基因UCP1和DNM1L,观察细菌对宿主细胞生理的影响。结果 敲除argR可提高细菌脂质储存能力,在以葡萄糖为单一碳源的培养基中更具生长优势(P<0.001);同时,M.smeg分枝菌酸合成上调;侵染A549细胞2 h后,入胞率显著增加(P<0.001),细菌毒力增强,对A549细胞的侵染能力提高,并通过影响线粒体功能影响宿主细胞的活力。结论 M.smeg精氨酸代谢负转录调控因子argR的敲除提升了细菌毒力,并可抑制宿主细胞线粒体功能。

• 单位
  遗传工程国家重点实验室; 复旦大学; 生命科学学院