摘要

目的研究草苁蓉环烯醚萜苷(IGBR)联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对人肝癌SMMC-7721细胞EMT的影响,探讨其可能的作用机制。方法 MTT法检测细胞活力并判断联合用药的相互作用;苏木素染色观察细胞形态变化;通过细胞黏附、划痕实验检测细胞的迁移能力;Western blot检测EMT相关蛋白表达;免疫荧光检测E-cadherin和Vimentin的定位情况。结果人肝癌细胞在给药48 h后,与对照组比较,给药组(IGBR组、5-Fu组、联合组)细胞活力均降低(P<0.05),IGBR联合5-Fu具有协同作用;与对照组比较,模型组TGF-β1诱导SMMC-7721细胞数量增多,呈梭形、多边形、并集聚成团,发生凝集;与模型组比较,给药组(IGBR组、5-Fu组、联合组)细胞数量少及发生纤维样改变的细胞数少;与对照组比较,模型组细胞的黏附率、划痕愈合率增加(P<0.05),与模型组相比,给药组(IGBR组、5-Fu组、联合组)细胞黏附率、划痕迁移能力降低(P<0.05);与对照组比较,模型组MMP2、MMP7、MMP9、 Snail、Slug蛋白表达上调(P<0.05),与模型组比较,给药组MMP2、MMP7、MMP9、 Snail、Slug蛋白表达降低(P<0.05);与对照组比较,模型组E-cadherin荧光信号减弱,Vimentin荧光信号增强,与给药组(IGBR组、5-Fu组、联合组)比较,模型组E-cadherin荧光信号增强,Vimentin荧光信号减弱。结论 TGF-β1可以诱导SMMC-7721细胞发生EMT,IGBR和5-Fu可以抑制SMMC-7721细胞的迁移,抑制EMT相关机制的表达。