黄芩苷诱导小鼠结肠癌发生坏死性凋亡作用的体外研究

作者：杨爱霞; 吴彪; 何伟; 胡必成; 黄鹤归; 徐蕾; 张力凡

来源：医药导报, 2019, 38(02): 167-172.

• 黄芩苷
• 结肠癌
• z-VAD-fmk
• RIP3蛋白
• 坏死性凋亡

目的探讨黄芩苷对小鼠结肠癌CT26.WT细胞的作用及细胞死亡形式。方法 CT26.WT细胞分为4组,(1)正常对照组,加入新鲜培养基,常规培养;(2)黄芩苷组,加入终浓度为100μmol·L-1黄芩苷;(3) z-VAD-fmk组,加入终浓度为20μmol·L-1z-VAD-fmk;(4)联合用药组,加入终浓度为20μmol·L-1z-VAD-fmk 1 h后加入100μmol·L-1黄芩苷。采用CCK8法检测黄芩苷对细胞增殖抑制作用和细胞存活率。DAPI染色检测细胞核的变化;透射电镜观察细胞超微结构; QPCR法和Western blotting法检测黄芩苷对细胞内RIP3基因和蛋白表达水平的影响。结果与正常对照组比较,黄芩苷组和联合用药组差异有统计学意义(P<0.05);正常对照组细胞死亡率为(10.54±0.19)%,黄芩苷组为(34.93±0.16)%,z-VAD组为(11.23±0.59)%,联合用药组为(23.27±1.20)%(P<0.01)。与正常对照组比较,黄芩苷组核浓染,出现碎裂现象;与黄芩苷组比较,联合用药组核浓染,有明显核碎裂现象。电镜结果显示黄芩苷组细胞发生坏死性凋亡,细胞肿胀,线粒体肿胀,内容物泄漏。黄芩苷组RIP3 mRNA的表达明显上调(P<0.01),RIP3蛋白的表达明显增强(P<0.05)。结论黄芩苷诱导CT26.WT细胞发生坏死性凋亡,可使RIP3的基因和蛋白表达明显上调。

• 单位
  武汉市第一医院