氨基酮戊酸光动力疗法诱导中波紫外线应激性衰老成纤维细胞发生凋亡

作者：张丽超; 张海荣; 周炳荣^*; 骆丹^*; 马立文; 张家安; 王申; 易飞; Gozali Maya Valeska; 刘娟

来源：中华皮肤科杂志, 2015, 48(04): 256-260.

• 氨基酮戊酸
• 紫外线
• 成纤维细胞
• 细胞衰老
• 光化学疗法
• 氧化性应激
• 细胞凋亡

目的研究氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)对中波紫外线(UVB)应激性衰老成纤维细胞(UVB-SIPS-FB)的氧化损伤和凋亡作用。方法正常成纤维细胞及UVB-SIPS-FB均分为2h和6h孵育组, 每组内再分为7组:对照组、ALA组、100 J/cm2照光组、3组不同红光照射剂量ALA-PDT处理组(25 J/cm2组、50 J/cm2组、100 J/cm2组)及抗氧化剂NAC+ 50 J/cm2红光照射ALA-PDT处理组。采用635 nm红光(能量密度50 mW/cm2)照射处理后, 使用荧光显微镜、流式细胞仪检测各组细胞中活性氧及线粒体膜电位水平;Hoechst染色、流式细胞仪检测细胞凋亡率。数据用SPSS 13.0软件分析, 多组间均数行单因素方差分析, 结合q检验。结果孵育2 h, 25、50、100 J/cm2 ALA-PDT组UVB-SIPS-FB凋亡率(分别为7.34%±0.87%、8.39%±1.16%、17.03%±1.29%)较对照组(3.81%±0.59%)上升(F=102.70, 均P<0.05), NAC+ 50 J/cm2 ALA-PDT组凋亡率(5.35%±0.58%)下降(P<0.05);孵育6 h, 25、50、100 J/cm2 ALA-PDT组UVB-SIPS-FB凋亡率(分别为13.85%±1.71%、23.40%±2.14%、41.02%±2.73%)较对照组(5.09%±1.64%)显著上升(F=106.00, 均P<0.05), NAC+ 50 J/cm2 ALA-PDT组凋亡率(9.97%±3.23%)显著下降(P<0.05)。单纯ALA组或照光组UVB-SIPS-FB凋亡率与对照组差异均无统计学意义。ALA-PDT处理组细胞活性氧荧光强度显著上升, 线粒体去极化增强, 这些现象与ALA孵育时间及红光照射剂量均呈量效依赖性关系。使用抗氧化剂NAC预处理可以减少ALA-PDT诱导的活性氧增多及线粒体去极化增强, 与凋亡率变化一致。结论 ALA-PDT可诱导UVB-SIPS-FB出现明显的细胞凋亡, 其作用机制可能与ALA-PDT对细胞的氧化损伤有关。

• 单位
  南京医科大学第一附属医院