芹菜素调节AMPK/mTOR通路对子痫前期胎盘滋养细胞自噬的影响研究

作者：王**; 王少敏; 乔素兰; 李晓敬; 姚春霞; 布兰娜^*

来源：湖南中医药大学学报, 2023, 43(08): 1394-1401.

• 芹菜素
• 子痫前期
• 胎盘滋养细胞
• 自噬
• 迁移
• 侵袭
• 腺苷酸活化蛋白激酶
• 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

目的 探究芹菜素对子痫前期（preeclampsia, PE）胎盘滋养细胞自噬的影响及可能的作用机制。方法 取人绒毛膜滋养层HTR-8/Svneo细胞，采用缺氧复氧1 h(hypoxic-reoxygenation 1 h, H1R1)诱导建立PE细胞模型，并通过MTT法检测芹菜素对HTR-8/Svneo细胞毒性的影响。取对数生长期的HTR-8/Svneo细胞，分为对照组、H1R1组、腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphateactivated protein kinase, AMPK）激活剂阿卡地新（acadesine, AICAR）组（1 mmol/L）、芹菜素低剂量组（10μmol/L）、芹菜素高剂量组（20μmol/L）、芹菜素+AICAR组（芹菜素20μmol/L+AICAR 1 mmol/L）。采用MTT法检测细胞活力；透射电子显微镜观察细胞自噬情况；划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力；Western blot法检测细胞AMPK/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin, mTOR）通路和自噬、侵袭相关蛋白的表达。结果 与对照组比较，10、20μmol/L芹菜素对HTR-8/Svneo细胞增殖有促进作用（P<0.05）。与对照组比较，H1R1组细胞在24、48、72 h时细胞活力、划痕愈合率和穿膜细胞数、N-钙黏蛋白（Ncadherin）表达、p-mTOR/mTOR比值显著降低（P<0.05），微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ（microtubule-associated protein 1 light chain 3-Ⅱ, LC3Ⅱ）/微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ（microtubule-associated protein 1 light chain 3-Ⅰ, LC3Ⅰ）比值、Beclin-1和E-钙黏蛋白（Ecadherin）表达、p-AMPK/AMPK比值显著升高（P<0.05），自噬小体数量增多（P<0.05）；与H1R1组比较，芹菜素低、高剂量组细胞活力、划痕愈合率和穿膜细胞数、N-cadherin表达、p-mTOR/mTOR比值显著升高（P<0.05）,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin-1和E-cadherin表达、p-AMPK/AMPK比值显著降低（P<0.05），自噬小体数量减少（P<0.05）；与芹菜素高剂量组比较，芹菜素+AICAR组细胞在24、48、72 h时细胞活力、划痕愈合率和穿膜细胞数、N-cadherin表达、p-mTOR/mTOR比值显著降低（P<0.05）,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin-1和Ecadherin表达、p-AMPK/AMPK比值显著升高（P<0.05），自噬小体数量增多（P<0.05）。结论 芹菜素能增强滋养细胞的侵袭能力，改善PE，其作用机制可能与抑制AMPK/mTOR通路介导的胎盘滋养细胞过度自噬有关。

• 单位
  河北工程大学