洋川芎内酯A联合表柔比星干预膀胱癌5637细胞的作用机制研究

作者：林磊; 杨树立; 孙超群; 李宝山

来源：山东中医药大学学报, 2022, 46(05): 618-625.

DOI：10.16294/j.cnki.1007-659x.2022.05.014

• 洋川芎内酯A
• 膀胱癌
• 表柔比星
• 耐药性
• 耐药蛋白
• 裸鼠移植瘤

目的：研究洋川芎内酯A(SEA)联合表柔比星（EPI）干预膀胱癌5637细胞的作用机制，探讨SEA对EPI敏感性的影响。方法：采用CCK-8试剂盒检测人输尿管上皮永生化细胞SV-HUC-1和人膀胱癌细胞5637的细胞活力，选用人膀胱癌细胞5637进行后续实验，计算半数抑制浓度（IC50值）。将细胞随机分为对照组、SEA低剂量组（SEA10组）、SEA中剂量组（SEA20组）、SEA高剂量组（SEA40组）、EPI单独处理组（EPI组）和联合处理组（SEA40+EPI组）。流式细胞仪检测细胞凋亡；CCK-8试剂盒检测细胞光密度（OD）值；免疫蛋白质印迹法（Western blot）检测多药耐药关联蛋白1(MRP1)、肺耐药蛋白（LRP）、拓扑异构酶-Ⅱ（Topo-Ⅱ）蛋白水平。建立裸鼠移植瘤模型，随机分为对照组、SEA药物组、EPI药物组和SEA+EPI组，并采用相应药物灌胃进行干预。检测肿瘤体积；Western blot检测裸鼠移植瘤模型MRP1、增殖细胞核抗原（PCNA）、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)蛋白水平。结果：体外实验结果表明，与对照组比较，SEA20组、SEA40组和EPI组细胞凋亡率升高，OD值降低，MRP1、LRP蛋白水平降低，Topo-Ⅱ蛋白水平升高，差异均有统计学意义（P<0.05）；与EPI组比较，SEA40+EPI组细胞凋亡率升高，OD值降低，MRP1、LRP蛋白水平降低，Topo-Ⅱ蛋白水平升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。体内实验结果表明，与对照组比较，SEA药物组和EPI药物组裸鼠肿瘤体积缩小，PCNA蛋白水平降低、cleaved caspase-3蛋白水平升高，SEA药物组MRP1水平降低，EPI药物组MRP1水平升高，差异均有统计学意义（P<0.05）；与EPI药物组比较，SEA+EPI组裸鼠肿瘤体积缩小，MRP1、PCNA蛋白水平降低，cleaved caspase-3蛋白水平升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：SEA可通过抑制膀胱癌5637细胞增殖，诱导细胞凋亡，下调MRP1、LRP蛋白表达，上调Topo-Ⅱ蛋白表达，抑制裸鼠移植瘤肿瘤生长，从而增强对EPI的敏感性。

• 单位
  平顶山市第一人民医院; 河南大学第一附属医院