miR-106b对缺氧诱导的大鼠视网膜血管化的影响及其机制

作者：梁晓茜; 陈王灵; 陈运信; 许志伟

来源：眼科新进展, 2023, 43(08): 599-603.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2023.0121

• miR-106b
• 缺氧
• 视网膜血管化
• 缺氧诱导因子-1A
• 血管内皮生长因子A

目的 探讨miR-106b对缺氧诱导的大鼠视网膜血管化的影响及其机制。方法 本研究实验动物为无特定病原菌级SD怀孕大鼠所产的12只新生大鼠。将新生大鼠与母鼠(用于哺乳)随机分配至对照组与氧诱导视网膜病变(OIR)组，每组6只，对照组正常饲养，OIR组新生大鼠建立OIR模型。采用免疫荧光染色观察大鼠视网膜的组织学变化，采用实时荧光定量PCR检测大鼠视网膜组织中miR-106b的表达情况。分离大鼠视网膜微血管内皮细胞(MRMVEC),采用双荧光素酶报告基因系统实验与Western blot验证miR-106b与缺氧诱导因子-1A(HIF1A)、血管内皮生长因子A(VEGFA)的靶向关系。将MRMVEC分为5组：Nor组(常氧培养)、Hyp组(缺氧处理)、Hyp-miR组(转染miR-106b mimic后接受缺氧处理)、Hyp-miR-pcHIF组(转染pcDNA-HIF1A与miR-106b mimic后接受缺氧处理)与Hyp-miR-pcVEG组(转染pcDNA-VEGFA与miR-106b mimic后接受缺氧处理);分别采用CCK-8法、划痕实验与成管实验检测细胞增殖、迁移及体外血管形成能力。结果 免疫荧光染色结果显示：与对照组相比，OIR组大鼠视网膜血管内皮细胞增殖与迁移明显增强。实时荧光定量PCR检测结果显示：OIR组大鼠视网膜组织中miR-106b相对表达量(0.26±0.06)显著低于对照组(1.02±0.08),差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因系统实验与Western blot结果表明，miR-106可与HIF1A和VEGFA靶向结合并抑制其表达。与Nor组相比，Hyp组MRMVEC的相对细胞活力、相对迁移能力、相对血管形成能力均提高，差异均有统计学意义(均为P<0.05);与Hyp组相比，Hyp-miR组MRMVEC的相对细胞活力、相对迁移能力、相对血管形成能力均降低，差异均有统计学意义(均为P<0.05);与Hyp-miR组相比，Hyp-miR-pcHIF组与Hyp-miR-pcVEG组MRMVEC的相对细胞活力、相对迁移能力、相对血管形成能力均有所提高，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 上调miR-106b可靶向抑制HIF1A和VEGFA表达，从而减少缺氧诱导的视网膜微血管内皮细胞增殖、迁移与新生血管生成。

• 单位
  中山大学中山医学院; 中山眼科中心海南眼科医院; 中山大学