shRNA干扰URG11表达对骨肉瘤细胞恶性表型影响

作者：孟涛; 李玉霞; 李卫华; 潘华刚; 张淞; 王晓^*

来源：青岛大学学报(医学版), 2019, 55(06): 634-638.

• 骨肉瘤
• 上调基因11
• 肿瘤侵润
• 细胞运动
• 细胞凋亡

目的研究上调基因11(URG11)对骨肉瘤细胞(MG63)恶性表型的影响。方法用URG11短发夹RNA(shRNA)重组慢病毒感染细胞,以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)检测干扰效果。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定细胞增殖,流式细胞术测定细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭和迁移,Western blot检测裂解的半胱氨酸蛋白酶-9(Cleaved Caspase-9)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、裂解的半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和波形蛋白(Vimentin)等表达。结果 URG11 shRNA重组慢病毒感染MG63细胞后,URG11表达下降,差异有显著性(F=181.200、97.307,P<0.001);细胞存活率、侵袭和迁移数量降低,细胞凋亡率升高,E-cadherin、Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3蛋白表达水平升高,Vimentin、MMP-9和MMP-2蛋白表达水平降低,差异均有显著性(F=28.064～625.516,P<0.05)。结论 shRNA干扰URG11表达可抑制骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化,并诱导细胞凋亡。

• 单位
  河南大学淮河医院