尖孢镰刀菌亚麻专化型Folprp4基因参与调控菌丝生长和分生孢子发生

作者：董慧霞; 侯占铭^*

来源：中国生物工程杂志, 2022, 42(03): 13-26.

DOI：10.13523/j.cb.2110024

• Folprp4基因
• 尖孢镰刀菌亚麻专化型
• Split-Marker
• 基因敲除
• 致病性

目的：通过对尖孢镰刀菌中Folprp4基因的鉴定，揭示其在尖孢镰刀菌中的功能及致病相关性。方法：基于同源重组原理，根据测定出的Folprp4基因序列，应用Split-Marker重组技术构建含有潮霉素抗性基因(hph)的基因缺失盒。将基因缺失盒经PEG介导转化到野生型原生质体中，在含有潮霉素B的TCC培养基上筛选转化子，通过PCR正负筛查获得Folprp4基因缺失突变株(ΔFolprp4)。构建含有Folprp4基因的载体pZDH1,并将其转化到敲除突变体中进行互补测验。结果：与野生型(hm)和异位插入突变体(ecFolprp4)相比，敲除突变体菌丝生长受到严重阻碍，当野生型和异位插入突变体长满整个平板时，敲除突变体菌落呈小点状。敲除突变体的另一个显著变化是ΔFolprp4的分生孢子产量显著下降。侵染实验表明，ΔFolprp4对亚麻幼苗的毒力显著降低。互补实验表明，该互补载体的回复子(Folprp4-C)在菌落形态、生长速率、分生孢子产量和毒力方面均恢复到了野生型菌株。结论：Folprp4基因与尖孢镰刀菌的菌丝生长、分生孢子发生和致病性有关。

• 单位
  内蒙古师范大学